凍精解凍杯
大部分鄉(xiāng)村都推行了牛的冷凍精液配種新技術(shù)(簡稱冷配)。但有的進(jìn)行冷配后,牛的配種準(zhǔn)胎率不高。這是啥原因呢?據(jù)筆者調(diào)查分析,這項工作一般都是由農(nóng)村畜牧技術(shù)員擔(dān)任,他們在給母牛輸精的過程中問題并不大,問題主要出在了在冷凍精液和解凍方法掌握不準(zhǔn)確上。冷凍的期間以及長期的儲存中出現(xiàn)細(xì)胞的損害。大多數(shù)的損害出現(xiàn)在冷凍和解凍的過程中。冷凍過程中出現(xiàn)損害的主要原因是冰晶體形成和細(xì)胞脫水，破壞細(xì)胞壁（膜）和胞內(nèi)細(xì)胞器。精子形態(tài)，質(zhì)量和活力在解凍后明顯降低，而且冷凍增加了精子DNA的損害。進(jìn)一步的損害由樣品被微生物和高水平的超氧化物自由基污染引起，為了降低冰晶體形成和細(xì)胞脫水，在冷凍之前增加了一個冷凍保存方案。
各種冷凍保存解決方案在商業(yè)上是可行的，其中絕大多數(shù)都含有不同比例的甘油和白蛋白。冷凍之后樣品沉浸在液態(tài)氮中。一些技術(shù)已經(jīng)開發(fā)出來,試圖減少凍融造成的損害，其中包括凍結(jié)法，樣品在投入液態(tài)氮之前固定在氣相10分鐘，緩慢或多步驟的方法，樣品在逐漸冷卻的氣相中大約40待分鐘，使用一個可編程的程序降溫儀，預(yù)設(shè)冷卻率為1 - 10°C / min。
現(xiàn)將冷凍精液解凍的具體操作方法介紹如下,供大家參考。
解凍方法:凍精使用前必須預(yù)復(fù)溫解凍,而解凍后精子復(fù)蘇率高低,關(guān)鍵取決于解凍溫度;傳統(tǒng)解凍法：,即快取、快投、快融解。先將解凍液注入滅菌的小玻璃管中,然后用40℃~45℃溫水加溫,待解凍液溫度達(dá)到40℃時,打開液氮罐,馬上用長把鑷子向外提取凍精顆粒,并立即投入已加溫的解凍液中,邊溶化邊搖晃試管5~10秒,待凍精顆粒溶化到小米粒大時,迅速將試管取出水面,再繼續(xù)搖晃到全部溶化。
現(xiàn)代采用凍精解凍杯進(jìn)行解凍：使用注意事項：1.一定要先向杯子內(nèi)加水，然后才能通電2.加水量應(yīng)該高于傳感器的高度。
如果待顆粒溶化完再將試管取出水面,精子則迅速死亡。 精液解凍后立即輸精,不宜保存太久,一般不得超過2小時。否則,精子活力顯著降低而影響受胎率。為做到解凍后快輸精,待母牛保定好后再進(jìn)行解凍。
方法的可行性取決于實驗室的資源，使用凍結(jié)技術(shù),應(yīng)該測試公牛的精子和解凍后檢查,并應(yīng)定期進(jìn)行質(zhì)量控制計劃。
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